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    PCR實(shí)驗室設計

    來(lái)源:蘇州邁萊柏系統工程有限公司發(fā)布時(shí)間2021.10.18


    一、PCR實(shí)驗室布局

    PCR實(shí)驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產(chǎn)物分析區四個(gè)單獨的工作區域并設有專(zhuān)用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,擴增前區與擴增后區應嚴格分開(kāi)。實(shí)驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區→樣品制備區→擴增區→擴增產(chǎn)物分析區,不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區,不得逆向流動(dòng)。各工作區頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長(cháng)為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

    實(shí)驗室各區功能及主要設備

    1、試劑準備區:主要進(jìn)行試劑的制備、分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經(jīng)過(guò)其它區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的試劑。本區主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。

    對于氣流壓力的控制,本區并沒(méi)有嚴格的要求。

    2、樣品制備區:主要進(jìn)行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。

    本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染。

    3、擴增區:主要進(jìn)行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來(lái)自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來(lái)自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。本區主要設備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。

    本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。

    4、擴增產(chǎn)物分析區:擴增產(chǎn)物的測定。本區主要設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。

    本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。

    三、PCR實(shí)驗室通風(fēng)系統及壓力控制

    各區域之間應具備單向的實(shí)驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實(shí)驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實(shí)驗過(guò)程造成污染。

    PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區的壓力要求。

    四、PCR實(shí)驗室裝飾

    實(shí)驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過(guò)渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹(shù)脂自流坪,材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

    五、PCR實(shí)驗室注意事項

    1、幾個(gè)區域的大小設置情況,試劑準備區、擴增區、擴增產(chǎn)物分析區,空間可以相對小一些,樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。

    2、試劑準備區、樣品制備區設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。

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